Análise da viabilidade e infectividade de taquizoítas de <i>Toxoplasma gondii</i> em condições axênicas

Resumo

OBJETIVOS: investigar a infectividade e a viabilidade de formas taquizoítas de Toxoplasma gondii mantidas em meio axênico. MÉTODOS: taquizoítos de Toxoplasma gondii foram isolados de camundongos infectados, ressuspensos em tampão fosfato-salino pH 7,2 ou tampão fosfato-salino pH 7,2 mais soro fetal bovino a 10% ou 20% e incubados por 24 e 48 horas a 37ºC em atmosfera contendo 5% de CO2. A seguir os parasitos foram: (i) incubados com iodeto de propídio e analisados por citometria de fluxo utilizando a técnica de separação de células ativada por fluorescência (fluorescence activated cell sorting – FACS); (ii) injetados em camundongos para analisar a infectividade dos parasitos mantidos em condições axênicas; e (iii) adicionados à cultura de fibroblastos de embrião de camundongo para investigar a sua capacidade infectiva e multiplicativa com formação de rosetas e lise celular. RESULTADOS: a análise por citometria de fluxo mostrou que os taquizoítos de Toxoplasma gondii mantidos em tampão fosfato-salino suplementado com 20% de soro fetal bovino apresentaram elevada viabilidade celular. Os parasitos mantiveram sua infectividade nos sistemas in vivo e in vitro, respectivamente demonstrada por sua capacidade de se replicar em camundongos e de infectar culturas de fibroblastos. CONCLUSÕES: nossos dados abrem novas perspectivas para o estudo de diferentes aspectos da biologia do Toxoplasma gondii, incluindo mecanismos de nutrição, ensaios experimentais de drogas in vitro, ou estudos da biologia celular e molecular diretamente sobre o parasito.