Análise da viabilidade e infectividade de taquizoítas de <i>Toxoplasma gondii</i> em condições axênicas

Autores

  • Marialice Fonseca Ferreira-da-Silva Instituto de Genética da Universidade de Colônia
  • Andrea Henriques Pons Fiocruz
  • Roberto Carlos Tedesco Fiocruz
  • Helene Santos Barbosa Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz

Palavras-chave:

TOXOPLASMA GONDII / infectivity, TOXOPLASMA / isolation & purification, FLOW CYTOMETRY, MICROBIAL VIABILITY.

Resumo

OBJETIVOS: investigar a infectividade e a viabilidade de formas taquizoítas de Toxoplasma gondii mantidas em meio axênico. MÉTODOS: taquizoítos de Toxoplasma gondii foram isolados de camundongos infectados, ressuspensos em tampão fosfato-salino pH 7,2 ou tampão fosfato-salino pH 7,2 mais soro fetal bovino a 10% ou 20% e incubados por 24 e 48 horas a 37ºC em atmosfera contendo 5% de CO2. A seguir os parasitos foram: (i) incubados com iodeto de propídio e analisados por citometria de fluxo utilizando a técnica de separação de células ativada por fluorescência (fluorescence activated cell sorting – FACS); (ii) injetados em camundongos para analisar a infectividade dos parasitos mantidos em condições axênicas; e (iii) adicionados à cultura de fibroblastos de embrião de camundongo para investigar a sua capacidade infectiva e multiplicativa com formação de rosetas e lise celular. RESULTADOS: a análise por citometria de fluxo mostrou que os taquizoítos de Toxoplasma gondii mantidos em tampão fosfato-salino suplementado com 20% de soro fetal bovino apresentaram elevada viabilidade celular. Os parasitos mantiveram sua infectividade nos sistemas in vivo e in vitro, respectivamente demonstrada por sua capacidade de se replicar em camundongos e de infectar culturas de fibroblastos. CONCLUSÕES: nossos dados abrem novas perspectivas para o estudo de diferentes aspectos da biologia do Toxoplasma gondii, incluindo mecanismos de nutrição, ensaios experimentais de drogas in vitro, ou estudos da biologia celular e molecular diretamente sobre o parasito.

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Biografia do Autor

Marialice Fonseca Ferreira-da-Silva, Instituto de Genética da Universidade de Colônia

Pós-doutoranda do Instituto de Genética da Universidade de Colônia, Alemanha/Doutora em Biologia Celular e Molecular pelo Instituto Oswaldo Cruz, Fiocruz; Laboratório de Biologia Estrutural, Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, RJ, Brazil.

Helene Santos Barbosa, Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz

Helene Santos Barbosa Bolsista de Produtividade em Pesquisa do CNPq - Nível 2 Bacharelado e Licenciatura em Ciências Biológicas (1974), especialização em Protozoologia no Bernhard Nocht Institut na Alemanha (1980-1982) e doutorado em Biologia Celular e Molecular pela Fundação Oswaldo Cruz (1993). Atualmente é pesquisador titular da Fundação Oswaldo Cruz e Chefe do Laboratório de Biologia Estrutural do Instituto Oswaldo Cruz e Vice-Diretora de Ensino, Informação e Comunicação do Instituto Oswaldo Cruz. Atua nas áreas de Parasitologia e Biologia Celular, com ênfase em Protozoologia Parasitária Humana, principalmente nos seguintes temas: Toxoplasma gondii, toxoplasmose experimental, Trypanosoma cruzi, doença de Chagas e ultra-estrutura (microscopia eletrônica de transmissão e varredura). É docente permanente do Programa de Pós-graduação em Biologia Celular e Molecular do Instituto Oswaldo Cruz.

Publicado

2010-05-03

Como Citar

Ferreira-da-Silva, M. F., Pons, A. H., Tedesco, R. C., & Barbosa, H. S. (2010). Análise da viabilidade e infectividade de taquizoítas de <i>Toxoplasma gondii</i> em condições axênicas. Scientia Medica, 20(1), 93–98. Recuperado de https://revistaseletronicas.pucrs.br/ojs/index.php/scientiamedica/article/view/5928

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